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鲁南制药公司哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室

  • 日期:20100618
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  • 来源:大众日报
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    鲁南制药公司哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室成立于 2008 年,实验场地 2000多平方米,其中主体实验楼一层约 1800 平方米,辅助动力占地 300 多平方米。主体实验楼主要包括动物细胞培养、目的产物纯化和产品质量检测三部分。

    实验室拥有包括博士后、硕士在内的二十多名技术人员。 拥有动物细胞大规模培养罐、AKTA Pilot纯化系统、岛津高效液相色谱等大型进口设备二十余台;以现有的条件,可满足哺乳动物工程细胞的构建、动物细胞大规模培养、目的产物的纯化和产品的质量监测研究,以及中试规模的生产。

    动物细胞培养部分现有包括两名硕士研究生在内的六名技术人员,配备二氧化碳培养箱、倒置显微镜、两升和五升种子罐各一台,五十升哺乳动物细胞培养罐两台,全部采用国际上先进的设备。以目前技术条件,培养细胞密度高达 1000 万个/毫升,目的产物的表达量已高达1g/L 以上。

    目的产物纯化部分包括两名硕士研究生在内的八名技术人员,配备AKTA Pilot蛋白纯化系统、细胞澄清设备和蛋白超滤设备各一台。可从含有多种杂质、低目的蛋白含量的培养液中对目的产物的进行初纯化,并进一步精纯化最终获得高纯度与活性的目的产物。

    产品质量检测部分拥有包括一名硕士研究生在内的五名技术人员,配备岛津高效液相色谱、二氧化碳培养箱、蛋白分析仪和酶标仪等多种检测设备,可完成实验所需的各种检测需求,并能严格控制上市产品的质量。

    2009年底,产品的工艺已经基本成熟,准备放大生产,购买了从 5L-50L-500L 两条生产线,同时配备了下游纯化的生产设备,包括AKATAPRO — CESS 蛋白纯化系统, 500L的澄清和超滤装置,不同体积大小的配液储液罐十几台。

    哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室在按计划建设的同时,利用动物细胞大规模培养技术进行了新产品的开发取得了以下成果:

    1 、 动物细胞大规模培养的细胞密度达1.5×107/ml、细胞抗凋亡能力强、蛋白表达量流加培养达到 800-1400mg/L ,单细胞表达量 50pg/c/d ,各项技术指标均达到国内先进水平。

    2、开发出了无血清细胞培养基,并进行优化,使其适合所筛选的高效表达产品的哺乳动物细胞株的培养和生产。

    3、 建成动物细胞大规模培养的中试车间,采用无血清的细胞培养技术,摸索合适的大规模动物细胞培养的条件,采用关键的技术指标对细胞培养条件进行控制,以达到“ 高密度、连续高效培养和高表达”的状态。

    4、开发出了重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白新产品,用于治疗风湿和类风湿关节炎效果良好,目前已完成临床研究,即将获得新药证书。

    哺乳动物细胞培养国家工程实验室是鲁南制药集团第一个研究哺乳动物细胞培养的综合实验室,主要是通过细胞培养生产融合蛋白和单克隆抗体等生物技术产品,从国际和国内此类药物的生产和销售情况看,此类药物的疗效好,附加值高,是未来药物发展的主要方向。